| 產(chǎn)品名稱(chēng) |
小鼠肝星狀細(xì)胞 |
| 商品貨號(hào) |
MZ-460 |
| 組織來(lái)源 |
正常肝組織；小鼠 |
| 規(guī)格 |
5×105cells/T25培養(yǎng)瓶 |
| 生長(zhǎng)特性 |
貼壁 |
| 細(xì)胞形態(tài) |
梭形、多角形 |
| 細(xì)胞污染 |
HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測(cè)陰性。 |
| 細(xì)胞描述 |
肝臟星形細(xì)胞是小葉內(nèi)結(jié)締組織細(xì)胞，呈現(xiàn)肌成纖維細(xì)胞樣或脂肪細(xì)胞形態(tài)。他們參與肝臟細(xì)胞外基質(zhì)的穩(wěn)態(tài)，修復(fù)，再生，纖維化以有控制視黃醇的代謝，存儲(chǔ)和釋放。肝臟受傷后，肝臟星形細(xì)胞轉(zhuǎn)化成肌成纖維細(xì)胞樣，并且是纖維化的肝臟中 I 型膠原的主要來(lái)源。另外已發(fā)現(xiàn)在疾病狀態(tài)和肝內(nèi)門(mén)靜脈高壓的發(fā)病過(guò)程中，肝星狀細(xì)胞通過(guò)細(xì)胞收縮調(diào)節(jié)肝臟微循環(huán)。該細(xì)胞也能掌控電壓激活型鈣離子流動(dòng)，表達(dá)低親和力的生長(zhǎng)因子受體p75，并可在神經(jīng)生長(zhǎng)因子的刺激下導(dǎo)致凋亡。因此，星形細(xì)胞激活的分子調(diào)控在將來(lái)有助于治療纖維化肝，并且能減少慢性肝病患者的發(fā)病率和死亡率。 |
| 細(xì)胞傳代步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 |
| 細(xì)胞復(fù)蘇步驟 |
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。 |
| 細(xì)胞凍存步驟 |
待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml完全培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
