| 產(chǎn)品名稱 |
人膽道癌組織源性原代細(xì)胞 |
| 商品貨號(hào) |
MZ-4271 |
| 組織來源 |
中國成年病人手術(shù)后的膽道癌組織。 |
| 規(guī)格 |
5×105cells/T25培養(yǎng)瓶 |
| 細(xì)胞污染 |
HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測陰性。 |
| 細(xì)胞傳代步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 |
| 細(xì)胞復(fù)蘇步驟 |
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。 |
| 細(xì)胞凍存步驟 |
待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml完全培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
| 病理形態(tài)分析 |
（1）管壁浸潤型：可見于膽道的任何部位，最為多見。由于受累的管壁增厚，可致管腔變 小或狹窄，進(jìn)而可發(fā)生阻塞現(xiàn)象； （2）結(jié)節(jié)型：較管壁浸潤型少見，可見于較晚期的膽道癌，癌結(jié)節(jié)的直徑可1．5～5．0cm。 （3）腔內(nèi)乳頭狀型：最少見，可見于膽道的任何部位，但匯合部更為少見。此型可將膽道 腔完全阻塞。癌組織除主要向管腔內(nèi)生長外，亦可進(jìn)一步向管壁內(nèi)浸潤生長。 |
| 組織學(xué)分型 |
（1）乳頭狀腺癌：除個(gè)別為管壁浸潤型外，幾乎均為腔內(nèi)乳頭狀型； （2）高分化腺癌：在膽道癌中最多，可占2／3 以上，可見于任何部位。癌組織均在管壁內(nèi) 浸潤生長，環(huán)繞整個(gè)管壁。浸潤的癌組織呈大小不等，形狀不規(guī)則的腺體結(jié)構(gòu)，有的可擴(kuò)大 呈囊腔； （3）低分化腺癌：即分化差的腺癌，癌組織部分呈腺體結(jié)構(gòu)，部分為不規(guī)則的實(shí)性片塊， 亦在管壁內(nèi)彌漫浸潤生長； |
| 組織學(xué)分類 |
在解剖學(xué)上分為： （1）左右肝管癌； （2）肝總管癌； （3）膽囊管癌； （4）肝總管、膽囊管及膽總管匯合處癌； （5）膽總管癌； |
