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人原代食管平滑肌細胞
人原代食管平滑肌細胞
規格:
貨期:
編號:MZ-3552
品牌:Mingzhoubio

活化細胞
凍存細胞
熒光標記細胞

規格:
T25瓶
凍存管

產品名稱 人原代食管平滑肌細胞
商品貨號 MZ-3552
組織來源 正常人食管組織
規格 5×105cells/T25培養瓶
生長特性 貼壁
細胞形態 成纖維細胞樣
培養基 DMEM高糖培養基,含FBS、平滑肌細胞生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等(建議購買原代食管平滑肌細胞專用培養基)
細胞污染 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌檢測陰性。
細胞描述 食管是咽和胃之間的消化管,哺乳動物的食管結構上由內向外分四層:黏膜層、黏膜下層、肌層、外膜。食管平滑肌集中在肌層,僅在食管的下 2/3段存在,其中中段的 1/3位骨骼肌和平滑肌混合組成,下 1/3段全部為平滑肌,而上段?? 1/3 全部為骨骼肌。 食管的運動,上部的橫紋肌受舌咽神經和迷走神經的支配,這些運動神經元末梢以運動終板形式進入骨骼肌。迷走神經尚支配食管其余部分的平滑肌,其節前纖維末梢與食管壁內神經叢的節細胞發生突觸聯系,再發出節后纖維支配平滑肌細胞。在吞咽時,吞咽中樞興奮通過上述運動神經元和迷走神經傳出纖維,引起食管各段的肌肉發生蠕動。食管壁內神經叢可以不依賴外來神經來控制食管蠕動。細胞鑒定:平滑肌肌動蛋白(α-SMA)免疫熒光染色為陽性。
細胞傳代步驟 如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
細胞復蘇步驟 將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
細胞凍存步驟 待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,細胞變圓脫落后,加入2ml完全培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
主要功能 (1) 主要功能是負責食管的收縮蠕動,推動食物向下運動。 (2) 平滑肌的收縮可能是通過增加細胞內Ca2+濃度或激活G 蛋白,激活磷脂酶, 并激活PKC-epsilon 依賴的信號通路。 (3) 食管平滑肌細胞可以表達Na(+)通道。
主要病生理變化 (1) 食管癌。 (2) 食管炎。
姓名 手機號(微信同號) QQ
梅經理 17280875617 1438578920
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