克氏假單胞菌

 一、菌種簡介 

1、菌種名稱：克氏假單胞菌  Pseudomonas knackmussii

2、分離基物：土壤/椰子樹腐爛芯覆土

3、具體用途：研究

二、斜面或平板:

1、拿到安瓿管中平板形式提供的菌種后請及時使用，成置4-15度條件下暫存，一般不超過一周，我們隨附的空白平板供您應急.

2、若是多次使用，應制做成甘油管，放置在使-70℃至80℃冰箱或液氮中保藏。
方法見下。

三、凍干管:

1、將安瓿管上部(非樣品一端)在酒精燈上先均勻燒均表面，然后再燒灼上部一側；

2、滅菌水棉球點燒灼部位，出現裂紋后(注意安甌管不要倒置)；用滅菌鑷子敲開:

3.加入液體培養基約100uL(注意管壁可能會很燙，可冷卻后再加液)，打勻取少許接種至適宜培養基。

附: -80℃和液氮保藏方法:

(1) 培養:將菌種接種于合適培養基，培養基用固體或液體均可，對生長較快(如大部分弧菌、希瓦氏菌)和生長較慢的菌株用液體培養基培養比較好。培養時期掌握在對數生長期或對數生長后期。

(2)收集菌體:液體培養時，離心棄去上清液；以平板或斜面培養時，刮取菌體。

(3)保護劑:20%甘油(或20%甘油+5%海藻糖保藏效果更好)滅菌。

(4)分裝:將菌體與保護劑混勻，菌體用量不能太少，混勻后看上去要渾濁；分裝到若干凍存管。

(5)降溫:及時放冰箱，先放-20℃，1-2小時后轉移至-70℃至-80℃。如放入液氨中保藏，須注意樣品溫度降至-40℃以下再放。
(6)活化: 從冰箱或液氮中取出甘油管后，立即放置在40C溫水中搖晃使冰融化，約需50秒-100秒；吸取適量內容物至適宜培養基培養。

*也可從冰箱或液氮中取出后，用低溫冰盒保溫，牙簽刮取少許冰接種至合適培養基，甘油管可再放回原處低溫保藏(注意動作要快避免過度升溫)。

四、常用培養基

1、培養基名稱: 2216E

2216E培養基